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靈芝子實體的水抽出液,分成高、低分子量兩部份。水萃取之 |
後的子實體再用甲醇萃取,此萃取物依其電荷分為八部份。兩種萃 |
取物的各個部份,於不同濃度下用於對人類
T 類淋巴母細胞 |
(CEM-IW)進行XTT抗病毒分析,此試驗顯示活體外人類免疫缺失 |
病毒(HIV-1,Ⅲb變體)之細胞病變作用。此試驗使用一種
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tetrazolium試劑,該試劑可被活細胞代謝還原成一種可溶性、有色之 |
formazan
產物,此產物可藉光電比色計,於450奈米測量定量之,由 |
產物的吸光值(OD),可計算未受病毒感染細胞之50%抑制濃度 |
(IC_50),受病毒感染細胞之50%有效保
護濃度(EC_50)及活體 |
外治療指數(TI, IC_50/EC_50)。在每一分離部份的存在下,藉由測 |
量用HIV-1(HXBC2 病毒株)感染之Jurkat
T 淋巴細胞之上清液中 的 |
病毒反轉錄梅(RT)活性,與對照組比較,也能分析病毒的增生。 |
以高於125.0
微克/毫升的高分子量部份(GL-HMW)處理,計算 |
IC_50及EC_50值,顯示於此高劑量下對標的細胞沒有毒性,也沒有 |
抗病毒活性。相反地,用低分子量部份處理
,分別求其IC_50、 |
EC_50及TI值,各為125.0微克/毫升,11.0∼11.2微克/毫升
及大於 |
11.1∼11.3微克/毫升。顯示此低分子量部份對標的細胞沒有細胞毒 |
性,
但是對病毒增生卻有很強的抑制作用。甲醇粗抽出物(GLA) |
顯示IC_50是43.6∼ 44.4微克/毫升,EC_50是14.4∼43.6微克/毫升 |
,TI值是1.0∼3.1。因此此抽出物具有很強的抗病毒活性,正己烷層 |
(GLB)之IC_50是21.5∼22.4微克/毫升,
EC_50是15.2∼21.5微克 |
/毫升,顯示此部份也具有強抗病毒活性。乙酸乙酯層
(GLC)之 |
IC_50是27.1∼29.3微克/毫升,EC_50為27.1∼29.3微克/毫升,水
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可溶部份(GLD),其IC_50及EC_50都大於125.0微克/毫升,顯示 |
沒有細胞毒性
,也沒有抗病毒活性。中性部份(GLE)之IC_50是 |
14.8∼15.0微克/毫升,EC_50 是14.8∼15.0微克/毫升,顯示此部 |
份具有強細胞毒性,也有優異的抗病毒活性
。酸性部份(GLF)包 |
括靈芝酸及其衍生物,其IC_50及EC_50都大於125.0微克/
毫升, |
顯示沒有細胞毒性,也沒有抗病毒活性。鹼性部份(GLG)IC_50 |
為22.4∼ 24.6微克/毫升,EC_50為22.4∼24.6微克/毫升,顯示具 |
有優異抗病毒活性。兩性部份(GLH)之IC_50及EC_50都大於125.0 |
微克/毫升,顯示沒有細胞毒性,也不具有抗病毒活性。在反轉錄 |
梅分析中,GLC以50微克/毫升之劑量與Jurkat
T淋巴細胞一起培養 |
3天之後,可抑制病毒增生達75%。GLG以100微克/毫升之劑量處 |
理,培養3天之後,與對照組比較,病毒增生抑制作用達66%。這 |
些結果與 XTT分析結果一致,即GLC及GLG兩部份,在兩種試驗中 |
,使用不同的HIV-1病毒株 及不同的 T
淋巴細胞,都能抑制病毒增 |
生。這顯示靈芝之非正己烷部份及鹹性部份都有明顯的抗病毒成份 |
。在本研究中一個有趣的發現是:屬於靈芝酸及其衍生物的酸性部 |
份(GLF),並無任何抗病毒活性。在熱水萃取物中,只有低分子 |
量部份抑制病毒增生。在甲醇萃取物中,中性及鹼性部份都發現能 |
夠抑制病毒增生,顯示靈芝子實體有幾種成份能抑制人類免疫缺失 |
病毒增生。 |